Identificación in silico de regiones repetidas en tándem en el genoma de Ureaplasma diversum: Implicancias en el desarrollo de un esquema MLVA para la tipificación del agente

Autores/as

  • Sofía Gutierrez Departamento de Patología Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria, Universidad Nacional de Río Cuarto. Córdoba, Argentina
  • Jimena Seitz Departamento de Patología Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria, Universidad Nacional de Río Cuarto. Córdoba, Argentina
  • Fernando Ibañez Departamento de Ciencias Naturales, Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales, Universidad Nacional de Río Cuarto. Córdoba, Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Argentina.
  • José Ángel Giraudo Departamento de Patología Animal, Facultad de Agronomía y Veterinaria, Universidad Nacional de Río Cuarto. Córdoba, Argentina
  • Pablo Tamiozzo

Resumen

Ureaplasma diversum es un microorganismo patógeno que ha sido detectado en bovinos y en cerdos. Diferentes tipologías genéticas del agente han sido identificadas con anterioridad mediante técnicas pocos reproducibles o que conducen a resultados poco concluyentes. El objetivo del presente trabajo fue identificar in silico regiones repetidas en tándem (TR) en el genoma de U. diversum. Se analizó el genoma de la cepa U. diversum ATCC 49782, identificando las TR. Una vez identificadas las TR se diseñaron cebadores específicos, se realizó una PCR in silico y los productos fueron alineados contra la base de datos BLAST para determinar la especificidad de los mismos. De las 51 TR especie-específicas identificadas, el 54,9% (28) codificarían para proteínas hipotéticas, las restantes estarían ubicadas en regiones intergénicas. El tamaño de las TR identificadas varió entre 2 y 102 pares de bases, repetidas entre 1,9 y 21,5 veces, lo que permitiría discriminarlas por electroforesis o secuenciación. La identificación de un amplio repertorio de TR es el primer paso para la genotipificación del agente mediante un Análisis de Múltiples Locus de Regiones Repetidas en Tándem (MLVA), que constituiría un método más rápido, práctico y reproducible que otros métodos de tipificación previamente informados.

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.

Citas

Benson G. (1999). Tandem repeats finder: a program to analyze DNA sequences. Nucleic Acids Res. 27 (2): 573-580.

Burgher Y., Miranda L., Rodriguez-Roche R., de Almeida Campos A.C., Lobo E., Neves T., Martínez O., Timenetsky J. (2014). Ureaplasma diversum in pneumonic lungs of swine. Infect Genet Evol. 21:486-488. doi: 10.1016/j.meegid.2013.07.003.

Buzinhani M., Buim M.R., Yamaguti M., Oliveira R.C., Mettifogo E., Timenetsky, J.. (2007) Genotyping of Ureaplasma diversum isolates using pulsed-field electrophoresis. Vet J.; 73(3): 688–690. S1090-0233(06)00039-6 [pii] doi: 10.1016/j.tvjl.2006.02.001

Dos Santos L.F., Clavijo M.J., Sreevatsan S., Rovira A., Moreira M.A., Pieters M. (2015) Genotyping of Mycoplasma hyorhinis using multiple-locus variable number tandem repeat analysis. J Microbiol Methods. 111:87-92. doi: 10.1016/j.mimet.2015.02.003.

Hata E., Suzuki K., Hanyu H., Itoh M., Higuchi H., Kobayashi H. (2014). Molecular epidemiology of cases of Mycoplasma californicum infection in Japan. Appl Environ Microbiol. 80 (24): 7717-7724. doi: 10.1128/AEM.02488-14.

Joukhadar, R. y Jighly, A. (2012). Microsatellites grant more stable flanking genes. BMC Res Notes 5:556. doi: 10.1186/1756-0500-5-556.

Lindstedt, B.A. (2005). Multiple-locus variable number tandem repeats analysis for genetic fingerprinting of pathogenic bacteria. Electrophoresis. 26 (13): 2567-2582.

Marques L.M., Buzinhani M., Guimaraes A.M., Marques, R.C., Farias S.T., Neto R.L., Yamaguti M., Oliveira R.C., Timenetsky J. (2011). Intraspecific sequence variation in 16S rRNA gene of Ureaplasma diversum isolates. Vet microbiol 152(1–2): 205–211. doi: 10.1016/j.vetmic.2011.04.007

Marques L.M., Guimarães A.M., Martins H.B., Rezende I.S., Barbosa M.S., Campos G.B., do Nascimento N.C., Dos Santos A.P., Amorim A.T., Santos V.M., Messick J.B., Timenetsky J. (2015). Genome Sequence of Ureaplasma diversum Strain ATCC 49782. Genom Announc. 3(2). pii: e00314-15. doi: 10.1128/genomeA.00314-15.

Miller R., Chelmonska-Soyta A., Smits B., Foster R., Rosendal S. (1994). Ureaplasma diversum as a cause of reproductive disease in cattle. Vet Clin North Am: Food Anim Pract. 10, 479-490.

Pinho L., Thompson G., Rosenbusch R., Carvalheira J. (2012). Genotyping of Mycoplasma bovis isolates using multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis. J Microbiol Methods. 88 (3):377-385. doi: 10.1016/j.mimet.2012.01.003.

Seitz J., Sticotti E., Giruado J., Tamiozzo P. (2018). [Detection of Ureaplasma diversum in cows with and without granular vulvovaginitis from Argentina]. Ab Intus. 1, 89-92.

Vranckx K., Maes D., Calus D., Villarreal I., Pasmans F., Haesebrouck, F. (2011). Multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis is a suitable tool for differentiation of Mycoplasma hyopneumoniae strains without cultivation. J Clin Microbiol. 49 (5): 2020-2023. doi: 10.1128/JCM.00125-11.

Zhou K., Aertsen A., Michiels C.W. (2014). The role of variable DNA tandem repeats in bacterial adaptation. FEMS Microbiol Rev. 38 (1): 119-141. doi: 10.1111/1574-6976.12036.

Descargas

Publicado

05/05/2023

Cómo citar

Gutierrez, S., Seitz, J. ., Ibañez, F. ., Giraudo, J. Ángel, & Tamiozzo, P. (2023). Identificación in silico de regiones repetidas en tándem en el genoma de Ureaplasma diversum: Implicancias en el desarrollo de un esquema MLVA para la tipificación del agente. Ab Intus, (4). Recuperado a partir de http://www.ayv.unrc.edu.ar/ojs/index.php/Ab_Intus/article/view/84

Número

Sección

Notas técnicas